No One Lives Forever versetzt den Spieler zurück in die sechziger Jahre. Cate Archer ist eine fähige und attraktive Agentin der UNITY, einer mächtigen, weltweit operierenden Geheimorganisation, die sich dem Kampf gegen den global organisierten Terrorismus verschrieben hat. Als innerhalb weniger Tage mehrere Topagenten von UNITY mysteriösen Anschlägen zum Opfer fallen, bekommt Cate Archer den Auftrag, die dafür Verantwortlichen aufzuspüren und nach möglichen Motiven zu forschen. Schnell gerät ein Verbrechersyndikat mit dem merkwürdigen Namen H.A.R.N. und der skrupellose Oberbösewicht Dimitri Volkov ins Zentrum ihrer Ermittlungen.

No One Lives Forever bietet dem Spieler eine Vielzahl an Möglichkeiten, um die einzelnen Missionen erfolgreich abzuschließen. Außer diversen Schußwaffen (mit oder ohne Schalldämpfer) stehen Cate Archer eine ganze Reihe nützlicher Ausrüstungsgegenstände zur Verfügung. Mit ihrer Spezialsonnenbrille kann Cate die Umgebung abfotografieren und auffällige Objekte heranzoomen, ein Codeknacker ermöglicht ihr das Überbrücken von Sicherheitseinrichtungen, während sich simple Filzpantoffeln zum lautlosen Anschleichen eignen. Dem Spiel gelingt es, die Stimmung klassischer Agententhriller wie James Bond 007 einzufangen, diese mit einer filmreifen Hintergrundgeschichte zu verknüpfen und die Titelrolle mit einer sympathischen Spielheldin zu besetzen. Spielerisch bewegt sich No One Lives Forever ganz in der Tradition solch richtungsweisender Spieleklassiker wie Der Meisterdieb, Half Life oder Deus Ex. Aus der Ego-Perspektive bewegt man sich durch abwechslungsreich gestaltete 3D-Schauplätze. Je nach Mission und Aufgabenstellung wird vom Spieler eine andere Herangehensweise gefordert. Relativ glaubhaft wurde auch das Verhalten der Nichtspielerfiguren realisiert. Läuft Cate beispielsweise mit gezogener Waffe durch die Gegend, flüchten neutrale Passanten oder ducken sich schutzsuchend. Schlendert Cate aber unauffällig durch dieselben Straßen, kann sie durchaus die eine oder andere Information aufschnappen oder mit Passanten ins Gespräch kommen.

No One Lives Forever bietet eine Vielzahl sehr unterschiedlicher Spielaufgaben. Die klassische Observation bei Nacht gehört genauso dazu wie Aufträge unter Wasser oder zu Luft. Bei einigen Missionen ist es Kate auch möglich, diverse Fahrzeuge wie Motorräder oder Snowmobile zu benutzen, um weiterzukommen. Bei der Jagd nach Dimitri Volkow gelangt Cate zu den unterschiedlichsten Handlungsorten wie Marokko, Berlin, die Karibik und schlußendlich sogar auf eine russische Weltraumstation.